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核酸提取純化原則和要求
點擊次數：911 發布時間：2020-03-24
核酸提取包括DNA提取，RNA提取，質粒提取。核酸是遺傳信息的攜帶者，是基因表達的物質基礎，是分子生物學研究的主要對象。無論是進行核酸的結構還是功能研究，首先都需要對核酸進行提取和純化。它作為分子實驗中基礎的實驗之一，幾乎是所有實驗的基本，無論后續的克隆、PCR、qPCR、建庫測序等等都需要核酸才能順利進行。
核酸提取純化原則和要求
1.保證核酸一級結構的完整性
2.排除其它分子的污染（如提取DNA時排除RNA的干擾）
3.核酸樣品中不應存在對酶有抑制作用的有機溶劑和高濃度的金屬離子
4.盡可能降低蛋白質、多糖和脂類等大分子物質
可接受樣本類型多樣化
1) 血液樣本：全血、豬血、禽血、血卡血斑等；
2) 體液樣本：唾液、口腔拭子、精液、羊水、陰道拭子等；
3) 組織樣本：石蠟組織、鼠尾、鼠趾、豬耳、豬尾、蝦、魚等；
4) 植物樣本：各種葉片、根莖等；
5) 真菌樣本：蘑菇、香菇等；
6) 環境樣本：糞便、土壤等。
儀器是應用配套的核酸提取試劑來自動完成樣本核酸的提取工作的儀器。儀器分為兩類：一類是大型的自動化的，一般稱為自動液體工作站；另一類是小型自動核酸提取儀，利用封裝好的配套試劑自動完成提取純化過程。它配合提取單個標本的獨立分裝試劑，操作過程中，只需要加入標本動作，儀器自動完成提取純化的全過程。
核酸提取被用于許多分子生物化學試驗和診斷，是克隆、轉化、酶切、體外轉錄、擴增、測序等試驗的首要步驟。然而由于細胞內存在大量蛋白質、碳水化合物、原始樣品中的代謝物以及其它污染物，提取高質量的核酸并非易事。
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